МОРФОЛОГІЧНІ ЗМІНИ РОГІВКИ ПРИ НЕПРОНИКНІЙ МЕХАНІЧНІЙ ТРАВМІ ТА ЗА УМОВ КОРЕКЦІЇ КОРНЕРЕГЕЛЕМ І СТОВБУРОВИМИ КЛІТИНАМИ
DOI:
https://doi.org/10.24061/1727-0847.24.1.2025.09Ключові слова:
рогівка; експериментальна механічна травма; корекція; корнерегель; стовбурові клітиниАнотація
У роботі представлені результати дослідження морфологічних змін рогівки за умов нанесення непроникної механічної травми та на тлі корекції травматичного ушкодження Корнерегелем та стовбуровими клітинами.
Механічну травму моделювали шляхом нанесення концентричної епітеліальної насічки трепаном діаметром 7,0 мм у верхній половині рогівки, в межах якої одноразовим офтальмологічним скальпелем видаляли епітелій разом з переднім шаром строми рогівки (викроювали клапоть товщиною до 0,2 мм). Контроль відтворення ерозії здійснювали методом фарбування рогівки 0,5 % розчином флюоресцеїну.
Експериментальна модель пошкодження рогівки відтворювалась на обох очах кроля під місцевою епібульбарною анестезією 0,5 % розчином алкаїну та ретробульбарною анестезією 2 % розчином лідокаїну 1,0 мл.
Стовбурові клітини отримували із пуповини. Отримані мезенхімальні стовбурові клітини (МСК) імунофенотипували за допомогою проточної цитометрії BD Accuri™ C6 Plus Personal проточним цитометром (Becton Dickinson, USA) та мишачими моноклональними антитілами проти CD73, CD90, CD105, CD34 і CD45 (Invitrogen, USA). МСК були характеризовані як CD73+, CD90+, CD105+, CD34-, CD45-. Для експерименту використовувалися МСК на пасажі 10. Готували суспензію з розрахунку 4,35 млн МСК в 1 мл фізіологічного розчину натрію хлориду на 1 г Корнерегелю.
Для проведення гістологічних досліджень забирали шматочки рогівки кроля, фіксували в 10 % нейтральному забуференому формаліні. Подальшу обробку матеріалу з наступною заливкою в парафінові блоки здійснювали згідно загальноприйнятої методики. Отримані на роторному мікротомі AMR-400 зрізи товщиною 4-5 мкм забарвлювали гематоксиліном і еозином. Вивчення гістологічних препаратів здійснювали за допомогою світлооптичного мікроскопа MICROmed SEO SCAN і фотодокументували з використанням відеокамери Vision CCD Camera.
У результаті дослідження виявлено, що стовбурові клітини більш ефективно, ніж лише Корнерегель стимулюють оновлення переднього епітелію рогівки, передньої пограничної пластинки, а також сприяють покращенню структурної організації власної речовини.
Посилання
Wilson SE. Corneal wound healing. Exp Eye Res. 2020;197:108089. doi: 10.1016/j.exer.2020.108089.
Mohan RR, Kempuraj D, D'Souza S, Ghosh A. Corneal stromal repair and regeneration. Prog Retin Eye Res. 2022;91:101090. doi: 10.1016/j.preteyeres.2022.101090.
Kumar A, Yun H, Funderburgh ML, Du Y. Regenerative therapy for the Cornea. Prog Retin Eye Res. 2022;87:101011. doi: 10.1016/j.preteyeres.2021.101011.
Sharif Z, Sharif W. Corneal neovascularization: updates on pathophysiology, investigations & management. Rom J Ophthalmol. 2019;63(1):15-22.
Li J, Ma Y, Huang X, Xu L, Tang S. Bandage Contact Lenses versus Deproteinized Calf Blood Extract Eye Gel for Recurrent Corneal Erosion Syndrome: A Case-Control Study. Ther Clin Risk Manag. 2020;16:1109-15. doi: 10.2147/TCRM.S277282.
Silina EV, Manturova NE, Litvitskiy PF, Stupin VA. Comparative Analysis of the Effectiveness of Some Biological Injected Wound Healing Stimulators and Criteria for Its Evaluation. Drug Des Devel Ther. 2020;14:4869-83. doi: 10.2147/DDDT.S277047.
Nicula C, Szabo I, Ivan O. Stem cells treatment in the ocular surface regeneration. Rom J Ophthalmol. 2017;61(4):239-43.
Call M, Elzarka M, Kunesh M, Hura N, Birk DE, Kao WW. Therapeutic efficacy of mesenchymal stem cells for the treatment of congenital and acquired corneal opacity. Mol Vis. 2019;25:415-26.
Yao L, Li ZR, Su WR, Li YP, Lin ML, Zhang WX, et al. Role of mesenchymal stem cells on cornea wound healing induced by acute alkali burn. PLoS One. 2012;7(2):e30842. doi: 10.1371/journal.pone.0030842.
European Convention for the Protection of Vertebrate Animals Used for Experimental and Other Scientific Purposes. European Treaty Series - No. 123. Strasbourg; 18.III.1986.
Horal's'kyi LP, Khomych VT, Konons'kyi OI. Osnovy histolohichnoi tekhniky i morfofunktsional'ni metody doslidzhen' u normi ta pry patolohii [Fundamentals of histological techniques and morphofunctional research methods in normal and pathological conditions]. Zhytomyr: Polissia; 2011. 288 p. (in Ukrainian).
##submission.downloads##
Опубліковано
Номер
Розділ
Ліцензія
Ця робота ліцензується відповідно до Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License.
ВІДКРИТИЙ ДОСТУП
а) Автори залишають за собою право на авторство своєї роботи та передають журналу право першої публікації цієї роботи на умовах ліцензії Creative Commons Attribution License, котра дозволяє іншим особам вільно розповсюджувати опубліковану роботу з обов'язковим посиланням на авторів оригінальної роботи та першу публікацію роботи у цьому журналі.
б) Автори мають право укладати самостійні додаткові угоди щодо неексклюзивного розповсюдження роботи у тому вигляді, в якому вона була опублікована цим журналом (наприклад, розміщувати роботу в електронному сховищі установи або публікувати у складі монографії), за умови збереження посилання на першу публікацію роботи у цьому журналі.
в) Політика журналу дозволяє і заохочує розміщення авторами в мережі Інтернет (наприклад, у сховищах установ або на особистих веб-сайтах) рукопису роботи, як до подання цього рукопису до редакції, так і під час його редакційного опрацювання, оскільки це сприяє виникненню продуктивної наукової дискусії та позитивно позначається на оперативності та динаміці цитування опублікованої роботи (див. The Effect of Open Access).
